制备色谱到底是什么?
样品的前处理:
制备色谱柱子由于处理的样品多,比分析柱子更容易受污染,所以,---的前处理就显得非常的---。萃取、过滤、结晶、固相萃取等简单的分离方法,如果用得上,而且还不是很麻烦,就要尽可能多的采用以去掉杂质。
各种规格的玻璃柱子在实验室里头很容易得到,而且价格低廉,但玻璃柱子致命的弱点是它能承受的压力很小,且非常容易破碎。当由于压力太小而导致流动相流速很慢的时候,高位液面或加高压空气(或者氮气)的采用是一个简单的解决办法。在底下加真空,也能在一定程度上解决这个问题。
不锈钢柱子具有---的耐腐蚀、抗压力性能,但其价格相对很贵。如果,只有很小的分离任务且经费也允许,市面上直径为1cm的小型制备柱就是。
我想用hplc分离一个简单的多肽,我应该选用什么样的流动相,还有他的梯度,还有选用什么样的柱子
答: rp-hplc,c18柱可以制备很少量的肽。如果用rp-hplc,首先应该用同类型的分析柱子分析一下多肽含多少杂质,设置缓缓的梯度的分离样品,在根据分析柱子跑出的峰形,---制备色谱仪,逐渐放大纯化的方法。
流速变化:可能是因存在气泡、泄漏或泵问题(故障)导致流速与设定值发生变化,---制备色谱仪,导致保留时间变化。
气泡问题:可能伴有柱压过低或柱压波动,且保留时间延长。对于双头泵,如果只有一个泵头存在气泡,则流量和压力可能会发生脉动。
泄漏也会延长保留时间。查看接头如有液滴或结晶析出,可证明有泄露。请---注意色谱柱之前的接头。如果使用不锈钢配件,---制备色谱仪费用,通常将接头螺母手动拧紧,再扳手拧紧1/4圈,便可以阻止泄漏。使用peek接头时,应停止泵,松开接头,将管路推到接口端口的底部,再拧紧接头。拧紧peek接头时如果存在流动的液体,会导致管道在配件中滑动,产生柱外死体积,进而影响分离效果。
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