泵是hplc的动力系统。气相色谱的动力,实际上是钢瓶中气体的压力。而液体,它只有通过泵的转动而使之流动。
我们做一个类比:---类比成流动相,---类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么,---在---作为动力系统,流经着身体的各个系统。如果---跳得快点,那么血流量加大,那么血压升高。同样,泵流速提高,流动相流量增大,那么色谱系统压力增大;如果血管被---半堵了,那么同样的心跳速度,压力也会增大。同样道理,如果色谱系统被污染,---液相色谱,那么污染物堵在色谱柱头,或者各连接口等,那么泵同样的流速,就有可能压力变大。---液相色谱主要出问题的就是压力莫名地增大,一般认为是色谱系统被污染而堵,解决的方法就是查看各个部件,或者清洗流路等。
现代色谱分析法是有效而快速的分离、分析手段,既可用于定性分析,又可用于定量分析。---液相色谱法与气相色谱法的定性分析和定量分析方法(包括测定方式和计算方法)相同。在定性分析中,有用纯物质对照的色谱鉴定法,还有收集馏分与化学方法或其他仪器分析方法联用的非色谱鉴定法;在定量分析中,可以用峰高或峰面积以内标法、外标法或归一化法定量,并与微机联用作为现代化的分析工具。
定性分析
色谱分析法定性分析的目的就是确定每个色谱峰代表什么组分,从而确定由这些组分所构成的混合物试样的组成。常用的主要定性方法有色谱鉴定法和非色谱鉴定法两种。
1.色谱鉴定法定性
色谱鉴定法就是用纯物质对照定性,这是气相和---液相色谱法中常用的方便的一种定性方法,可以和定量测定操作同时进行。
(1)利用保留值定性
在色谱条件一定的情况下(包括柱长、柱内径、固定相、柱温、流动相及流速等),每一种物质都有其一定的保留值(包括保留时间、保留体积、调整保留时间、调整保留体积等),一般不受其他组分的影响,可以作为定性的根据。此法又称为纯物质对照定性。
在相同的色谱条件下,---液相色谱哪个稳定性好,先测定未知物中每个色谱峰的保留时间或保留距离,再将要测的某纯物质注入色谱仪,对照比较两者的保留值,如果两者的保留值相同,---液相色谱报价,就可判定该未知物与已知纯物质是同一种物质。
(2)利用加入纯物质增加峰高法定性
在稳定的色谱条件下,为了区分两个保留值(保留时间或保留距离)非常接近的组分,可以将某纯物质直接加入到试样中,再注入色谱仪,如果某组分峰的峰高增加了,---液相色谱多少钱,表明这个色谱峰就是加入的纯物质。此法又称为纯物质追加法定性。
色谱鉴定法定性需要有纯物质对照,在没有纯物质时,可以用非色谱鉴定法定性。
01---液相色谱以---的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是---的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂( 硅胶、氧化铝等)。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大,传质扩散慢,因而柱效低,分离能力差,只能进行简单混合物的分离。而---液相所用的固定相粒度小(5um-10um)、传质快、柱效高。
---液相色谱法(hplc)是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。近年来,在保健的食品功效成分、营养强化剂、---类、蛋白质的分离测定等应用广泛。上约有80%的有机化合物可以用hplc来分析测定。
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