液相色谱-液相色谱方法----通恒(商家)

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    2022-7-7

李经理
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hplc灵敏度不够的主要原因及解决办法是什么?

样品量不足,解决办法为增加样品量

样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器

检测器衰减太多。调整衰减即可。

检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数

检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗。

检测池中有气泡。解决办法为排气。

记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。

流动相流量不合适。调整流速即可。

⑩检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。




---液相色谱法实验结果分析

现代色谱分析法是有效而快速的分离、分析手段,既可用于定性分析,又可用于定量分析。---液相色谱法与气相色谱法的定性分析和定量分析方法(包括测定方式和计算方法)相同。在定性分析中,有用纯物质对照的色谱鉴定法,还有收集馏分与化学方法或其他仪器分析方法联用的非色谱鉴定法;在定量分析中,可以用峰高或峰面积以内标法、外标法或归一化法定量,并与微机联用作为现代化的分析工具。

定性分析

色谱分析法定性分析的目的就是确定每个色谱峰代表什么组分,从而确定由这些组分所构成的混合物试样的组成。常用的主要定性方法有色谱鉴定法和非色谱鉴定法两种。

1.色谱鉴定法定性

色谱鉴定法就是用纯物质对照定性,这是气相和---液相色谱法中常用的方便的一种定性方法,可以和定量测定操作同时进行。

(1)利用保留值定性

在色谱条件一定的情况下(包括柱长、柱内径、固定相、柱温、流动相及流速等),每一种物质都有其一定的保留值(包括保留时间、保留体积、调整保留时间、调整保留体积等),一般不受其他组分的影响,可以作为定性的根据。此法又称为纯物质对照定性。

在相同的色谱条件下,先测定未知物中每个色谱峰的保留时间或保留距离,再将要测的某纯物质注入色谱仪,---液相色谱效果好,对照比较两者的保留值,如果两者的保留值相同,就可判定该未知物与已知纯物质是同一种物质。

(2)利用加入纯物质增加峰高法定性

在稳定的色谱条件下,为了区分两个保留值(保留时间或保留距离)非常接近的组分,---液相色谱,可以将某纯物质直接加入到试样中,---液相色谱方法,再注入色谱仪,如果某组分峰的峰高增加了,表明这个色谱峰就是加入的纯物质。此法又称为纯物质追加法定性。

色谱鉴定法定性需要有纯物质对照,在没有纯物质时,---液相色谱,可以用非色谱鉴定法定性。




---液相色谱

---液相色谱法自20世纪60年代问世以来,由于使用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品的高速、---和高灵敏度的分离测定。---液相色谱由于吸取了---液相色谱的研制经验,并引入微处理机技术,---的提高了仪器的自动化水平和分析精度。现在用微处理机控制的---液相色谱仪,其自动化程度---,既能控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),又能对获得的色谱图进行收缩、放大、叠加,以及对保留数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析---提供了高的效率、功能齐全的分析工具。





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