液相色谱具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反---用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、环境分析、无机分析等各种领域。---液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视;液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类,海水中的不挥发烃类,使环境污染分析得到新的发展。使用---液相色谱仪的领域很多,主要因为其灵敏度高、速度快等等优点。---液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
现代色谱分析法是有效而快速的分离、分析手段,既可用于定性分析,又可用于定量分析。---液相色谱法与气相色谱法的定性分析和定量分析方法(包括测定方式和计算方法)相同。在定性分析中,有用纯物质对照的色谱鉴定法,还有收集馏分与化学方法或其他仪器分析方法联用的非色谱鉴定法;在定量分析中,---液相色谱效果好,可以用峰高或峰面积以内标法、外标法或归一化法定量,并与微机联用作为现代化的分析工具。
定性分析
色谱分析法定性分析的目的就是确定每个色谱峰代表什么组分,从而确定由这些组分所构成的混合物试样的组成。常用的主要定性方法有色谱鉴定法和非色谱鉴定法两种。
1.色谱鉴定法定性
色谱鉴定法就是用纯物质对照定性,这是气相和---液相色谱法中常用的方便的一种定性方法,可以和定量测定操作同时进行。
(1)利用保留值定性
在色谱条件一定的情况下(包括柱长、柱内径、固定相、柱温、流动相及流速等),每一种物质都有其一定的保留值(包括保留时间、保留体积、调整保留时间、调整保留体积等),一般不受其他组分的影响,可以作为定性的根据。此法又称为纯物质对照定性。
在相同的色谱条件下,---液相色谱多少钱,先测定未知物中每个色谱峰的保留时间或保留距离,再将要测的某纯物质注入色谱仪,对照比较两者的保留值,如果两者的保留值相同,就可判定该未知物与已知纯物质是同一种物质。
(2)利用加入纯物质增加峰高法定性
在稳定的色谱条件下,为了区分两个保留值(保留时间或保留距离)非常接近的组分,---液相色谱,可以将某纯物质直接加入到试样中,再注入色谱仪,如果某组分峰的峰高增加了,表明这个色谱峰就是加入的纯物质。此法又称为纯物质追加法定性。
色谱鉴定法定性需要有纯物质对照,在没有纯物质时,可以用非色谱鉴定法定性。
这是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或---)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2000~20000的范围之间。
当需要从大量的物质中分离纯化不足1%的所需成分时,分离工作将会十分困难,往往在纯化的后面阶段需要使用10μm或更小颗粒的---填料。为获得所需微量组分,可采用如下分离手段:制备型分离***半制备型分离***分析型分离***产物。为提高每次分离获得纯品的数量,制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。
高压液相色谱,---液相色谱报价,即目前常用的---液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3~30μm),为使流动相流出,需采用较高的压力,同时系统的复杂性及成本亦增大,但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时,如中压液相色谱系统,装柱较容易,柱的通透性较高(只需较低的泵压力),可采用的色谱柱和更经济的仪器,由此分辨率也较低。
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